Материал и методики исследований

Экспериментальная часть работы выполнена в ТОО “Прииртышская бройлерная птицефабрика”, на территории птицефабрики АО “Семейптица” в ТОО крестьянском хозяйстве “КАСКЕ” и в лаборатории кафедры инфекционных и инвазионных болезней Семипалатинского Государственного университета имени Шакарима работа проводилась в период с 1997 г.по 2000 г. Изучение видового состава и экологическое наблюдение мух проводили в период с 1997 по 1999 гг. на территорий хозяйств и производственных блоках по общепринятой методике.

Места выплода мух выявляли путем ежедекодных обследовании и сборов проб субстрата на площадке хранения помета птицефабрик и птицехозяйств. С разнообразных мест выплода мух для исследовании взято 125 проб, насчитывающих 24500 личинок. В лаборатории кафедры их содержали в садках, доводили до имаго и использовали в экспериментальных работах.

Для анализа количественного соотношения и экологической оценки разных таксонов мух пользовались категориями: индекс обилия (И.О. – среднее число особей данного вида на единицу учета), индекс доминирования (И.Д. – процентное соотношение), индекс встречаемости (И.В. – степень обнаружения особей определенного вида в количестве просмотренных проб) по В.К. Беклемишеву.

Сбор и учет фаунистического материала и экологические наблюдения зоофильных мух в условиях птицехозяйств проводили ежедекадно, с раннего утра (6 – 7 часов) и до наступления сумерек (21 – 22 часа) с интервалом 2 часа между сборами. Одновременно регистрировали показатели микроклимата территории и производственных объектов птицехозяйств: относительную влажность и температуру – спиртовыми термометрами и психрометром Ассмана, освещенность – люксметром Ю – 16 и силу ветра – анемометром Фусса.

Видовую принадлежность мух определяли с помощью микроскопа МБС – 9 и “Определителя насекомых Европейской части СССР” (1969, 1970) и определителя И.С Зимина “Семейство Muscidae: Насекомые двукрылые” (1951) , а также эталлонных экземпляров, полученных из лаборатории энтомологии ВНИИВЭА. В определений видовой принадлежности мух оказали помощь доктор биологических наук, профессор Ж. М. Исимбеков и кандидат биологических наук Ф.С. Насыров, за что выражаю им искреннюю благодарность. Всего собрано и просмотрено свыше 25 тыс. мух.

Места выплода мух выявляли путем ежедекадных обследовании и взятием проб субстрата. С разнообразных мест выплода мух исследовано 125 проб, насчитывающих 21000 личинок мух. В лаборатории кафедры их содержали в садках, доводили до имаго и использовали для экспериментальных работ.

Для проведения исследовании в лаборатории кафедры был оборудован специальный инсектарий, в которой стабильно поддерживалась температура воздуха на уровне (28 – 30) ° С и относительная влажность (60 – 70) %. Помещение инсектария оборудован приточно – вытяжной вентиляцией. Окна и двери инсектария были засечены металлической сеткой размером ячеек не более 1,5 – 2 мм. В инсектарии в течении сутки создавали (с помощью автоматики) периоды освещения (на уровне 300 – 400 ЛК) – 16 и затемнение – 8 часов.

В инсектарии взрослые мухи содержались в специальных стационарных садках (размеры: высота - 25; ширина - 25; длина - 25). Садок имеет основание и металлический каркас, стенки которого выполнены, кроме правой боковой стеклянной, из металлической сетки (размером ячеек 1,5 х 1,5 мм). В основании садка установлен источник тепла в виде сухого тена и вентилятор для принудительной вентиляции. В верхней стенке садка вмонтирован источник дневного света (лампа дневного света), а с левой стороны садка установлена лампа ультрафиолетового облучения ( ). На лицевой стороне садка проделано отверстие диаметром 12 см, через которую в садок помещают емкости с кормом и субстратом для яйцекладок. Емкость для корма выполнена из дерева в виде плоской прямоугольной чашки с частыми продольными прорезами шириной не более 3 мм. Такое устройство кормушки предохраняет мух от проваливания в жидкость и уменьшает их смертность. Контейнер для сбора яиц представляет собой чашку Петри, накрытую пластмассовой крышкой с оверстием – 2 см для предохранения от высыхания.

Для полевых исследовании изготовлен специальный полевой садок “Наседка”. Садок представляет собой металический каркас обтянутую капроновой сеткой. Дно садка изготовлена из металлической сетки размером ячеек не более 3 мм. Яйцекладка самками мух производится прямо в субстрат, для этого садок размещают над лотком-культиватором на расстоянии 1 мм от поверхности субстрата.

Проведено серия опытов по выведению популяции мух адаптированой к массовому культивированию в лабораторных и хозяйственных условиях. Селекция и отбор велось по изучению и улучшению следующих показателей: длительности жизни имаго в садках лаборатории (в сутках); длительности продуктивного периода (в сутках); яйцепродуктивности самки популяции в течении сутки и физиологического возроста (штук); количество яиц полученные в садках от 100 самок (в гр). Всего в опытах с имаго было использованно свыше 80 тыс комнатных мух.

Для проведения опытов на территории птицехозяйств сачком отлавливались мухи природной популяции и содержались в садках объемом 0,15 м³ (размером сторон 25 см). Яйцекладку получали в субстрат, состоящий из 100 гр пшеничных отрубей, 10 гр сухого молока и 100 мл воды. Субстрат помещали в заранее приготовленный контейнер. Полученную порцию яиц подсчитывали и вносили в куринный помет с рачетом (0,4 – 0,65) гр на один килограмм субстрата. В дальнейшем выращивание личинок производили в лаборатории кафедры в стеклянных банках объемом 1 литр при температуре (25 – 28) °С, и нормальной вентиляцией в течении пяти суток. На стадии предкуколки, переработанный субстрат с выросшими личинками, помещали на энтомологический столик для сбора пупариев по методике А.М. Псарева, В.А. Кащеева (1987). В дальнейшем с целью получения имаго с лучшими продуктивными качествами отбтрали пупарии с массой не менее 25 мг и помещали их в чашку Петри с очищенным песком. Выведение мух производили в садках. Стадии куколок комнатной мухи проходило при температуре (26 -–28) °С, относительной влажности (75 – 77) %. Садки вентилировались для поддержания свежести воздуха. При таких параметрах микроклимата в садках выплаживание мух происходило на пятые сутки. Полученные взрослые мухи отбтрались по полу в нужном количестве и размещали их в дпугие садки с целью дальнейшего культивирования, исследования их жизнеспособности и продуктивности в условиях лаборатории. Для отлова мух и разделения их по полу использовали стеклянную воронку, на дно которого клали вату слегка пропитанную эфиром, затем отловленных мух помещали в садок с активной вентиляцией. В садках объемом 0,15 м³ содержали по 200 мух, из которых самки состовляли 75 %.

Кормление, поение и получение яйцекладок мух производили в садке. Для кормления имаго мух применили углеводные и белковые корма. В качестве белкового корма использовали сухое молоко, кровь животного и яичный белок, а свекловичный сахар как углеводный корм. Вскармливание углеводно- белкового корма в сухом или разбавленном виде с водой производили как раздельно, так и в смешанном состоянии. Поение мух проводили через смоченный водой ватный тампон, а также с помощью капиллярной поилки.

Капиллярная поилка представляет собой хлопчатобумажный шпагат диаметром 6 – 7 мм. Над всеми садками устонавливается емкость с чистой водой ко дну которого крепится кран со шпагатом, последний провисает по всем садкам. Открывая кран можно регулировать подачу воды, таким образом, чтобы шпагат по всей длине был пропитан водой, а концу шпагата вода испарялась и непросачивалась в садок.

Для получения яйцекладок использовали субстрат состоящий из пшеничных отрубей в которую добавлялось сухое молоко и смачивалось водой. Самками мух яйца откладывались в субстрат на глубину 0,5 – 1 мм, яйца подсчитывались и вносились в куриный помет.

Выращивание личинок комнатной мухи производили в производственных условиях на территории пометохранилища птицефабрики АО «Семейкус». Для этого были изготовлены специальные три контейнера, в каждую из которых входили по 5 лотков-культиваторов. Размер одного лотка: длина 45 см, ширина 30 см и высота бортов 15 см ( с изогнутыми во внутрь краями) со сплошным металлическим дном. Верх устройства сделан из металлического шифера, а боковые стороны обтянуты сицевой тканью для аэрации воздуха и защиты от яйцекладок мух природной (дикой) популяции. В производственных условиях для выращивания личинок использовали универсальное устройство, которая предназначена для обеспечения успешного роста личинок и их отделения от субстрата. Устройство-культиватор имеет каркас с размещенными на ней четыремя лотками – культиваторами. К дну каждого подведен источник тепла обеспечивающие отделение выросших личинок под действием высокой температуры (48 – 52) °С.

Яйца комнатной мухи вносили в субстрат с рачетом (0,4 – 0,65) гр на 1 кг птичьего помета и содержали выпладивших личинок (3,5 – 4,5) суток. С целью ускорение развития и увеличения массы личинок, в лаборатории кафедры и на территории пометохранилища птицефабрики были проведены опыты по обогощению субстрата. Для этого в качестве добавки к помету птиц использовали отход пивоваренной промышленности – солодовые ростки. Их вносили в субстрат в количестве (3,5,10,14) %, в контрольных лотках личинок выращивали в чистом помете кур без добавок. В стадии предкуколки они отделялись от переработанного субстрата, взвешивались и массы их, полученные при различных вариантах кормления и содержания сравнивались.

Отделение выросших личинок от переработанного субстрата производились на месте их выращивания. Для этого применили методы отрицательного фототаксиса и метод воздействия высоких температур на личинок в стадии предкуколки. Первый основан на самостоятельной миграции личинок из субстрата под воздействием света (свыше 500 ЛК).

С этй целью субстрат с выросшими личинками раскладывали на сетчатую поверхность (размером ячеек 2 – 2,5 мм) и освещали поверхность субстрата, при этом взрослые личинки проникают в глубь среды обитания и проваливаются в емкость для их сбора.

Выращивание личинок комнатной мухи и их отделение от переработанного субстрата используя метод действия высоких температур на личинок производили в универсальном устройстве-культиваторе. С этой целью при достижении личинками стадии предкуколки в лотке-культиваторе температура субстрата доводится до (48 – 52) °С, что заставляет личинок покидать субстрат и они оказываются в специальной емкости с водой. Полученная личиночная биомасса может использоватся как в свежем так и в высушенном виде, предварительно промыв, стерилизовав с помощью ультрофиолетового облучателя (ДБ – 30). Обработанная таким образом личиночная биомасса в специальном установке подвергалась высушиванию, а пробы массы подвергались микробиологическому исследованию с целью определить безопасность корма в эпизоотологическом отношении.

Исследование личинок в свежем и в переработанном виде на бактериальную загрязненность проводили в лаборатории кафедры. С этой целью с помета птиц были отобраны личинки и подвергли их различным методам обеззараживания. В первую группу включил личинок, чисто промытых в воде, во вторую группу личинки, промытые в воде и дополнительно облученные ультрафиолетовым светом и в третью группу - высушенные личинки. Бактериологическое исследование проводили общепринятыми методиками в следующим порядке: в первый день произвели посев проб личиночной массы из каждой группы по 2 мл на МПА и среду Эндо, все чашки были пронумерованы и поставлены в термостат на 24 часа. Во второй день отобрали самые ярко выраженные колонии и с них сделали посев чистой культуры в пробирки с МПА предварительно приготовив с каждой из них мазки окрашенные по Грамму. В третьи день из пробирки с чистой культурой произвели посев на дифференцированные среды и на МПБ. Полученные микроорганизмы дифференциированы с помощью поределителя микроорганизмов Полтева В.И. (1969) и изучены культуральные свойства выделенной микрофлоры.

В условиях лаборатории исследования кормов мы провели ряд анализов по определению общей питательной ценности сухой личиночной биомассы. При этом мы использовали общепринятые методики ВИЖа. Определение общего азота и сырого протеина проводили методом Кьельдаля. Также были проведены исследования по определению сырого жира /учеб. ЗООТ,АНАЛИЗ/.

Завершающим этапом экспериментальных исследовании являлось разработка вариантом вскармливания полученного белкового корма птице. Опыты проводились в птичниках бройлерной фабрики ТОО «ПБП» и в малом хозяйстве ТОО «КАСКЕ». Для проведения опытов были составлены 8 групп цыплят-бройлеров по 20 цыплят в каждой, из которых 2 группы являлись контрольными, а 6 опытными. Опыты по вскармливанию цыплятам-бройлерам рациона с добавкой кормового белка, полученного от мух проводили в течении 2 месяцев. Цыплят содержали напольным методом с обеспечением нормальных зоогигиенических условии.

Основу рациона птиц составил птичий комбикорм, закупленный в мукомольно-комбикормовом комбинате г. Семипалатинска. (состав комбикорма показан в главе 1.2.4.4). В состав комбикорма опытным группам в качестве белковой добавки была включена сухая личиночная биомасса полученная выращиванием комнатной мухи. Контрольную группу цыплят вскармливали комбикормом с добавлением в качестве белковой добавки мясо-костную муку.

По истечении 2-х месяцев всех цыплят опытных и контрольных групп взвешивали и по максимальной массе цыплят одной из опытных групп определяли наилучший вариант состава корма с количеством белковой массы личинок в качестве добавки. Полученные данные подвергнуты статистической обработке и приведены в соответствие главе диссертационной работы

Статистическую обработку полученного материала проводили по Н.В. Садовскому (1975).