Испытания на подлинность и чистоту. Для испытания на подлинность производных пиразола используют ИК- и УФ-спектрофотометрию

Для испытания на подлинность производных пиразола используют ИК- и УФ-спектрофотометрию. На основе исследований ИК-спектров разработана схема идентификации производных пиразола по расположению характеристических полос поглощения. НД рекомендует подтверждать подлинность по ИК-спектрам, снятым в виде спрессованных таблеток лекарственных веществ с бромидом калия в области 4000-400 см^–1, которые должны полностью совпадать с прилагаемыми к ФС рисунками спектров.

Производные пиразола можно идентифицировать с помощью УФ-спектров. Раствор феназона в 0,1 М серной кислоте имеет максимум поглощения при 230 нм. Водные растворы метамизола-натрия характеризуются максимумами поглощения при 237 и 270 нм, а растворы в этаноле — при 236,5 и 264,5 нм. Раствор пропифеназона в воде имеет максимум поглощения при 240 нм, фенилбутазона в 0,01 М растворе гидроксида натрия — при 263-265 нм, а в этаноле — при 240 нм.

Особенно широко для подтверждения подлинности производных пиразола используют реакции окисления. С раствором хлорида железа (III) метамизол-натрий образует продукты окисления, окрашенные в синий цвет. Окраска быстро изменяется под влиянием различных факторов (температура, pH среды и т.д.). Окрашенные продукты образуются и под действием других окислителей. Пропифеназон под действием раствора нитрата серебра приобретает вначале фиолетовое окрашивание, затем выпадает серовато-коричневый осадок серебра. Феназон с этим реактивом положительной реакции не дает. При добавлении 0,1 М раствора иода раствор метамизола-натрия приобретает фиолетовую или красно-фиолетовую окраску, переходящую от избытка реактива в бурую. Добавление к подкисленному серной кислотой 10%-ному водному раствору метамизола-натрия свежеприготовленного раствора хлорной извести приводит к появлению голубого окрашивания, переходящего в зеленое, а затем в желтое.

Фенилбутазон может быть окислен только в более жестких условиях (действием концентрированной серной кислотой в присутствии нитрита натрия). При нагревании появляется оранжевое окрашивание, переходящее в более стойкое вишневое окрашивание и выделяются пузырьки газа. Феназон в этих условиях приобретает красно-оранжевое, а метамизол-натрий — буро-желтое окрашивание.

Реакции окисления фенилбутазона обусловлены наличием в его молекуле остатка гидразобензола, который окисляется до окрашенных производных азобензола:

При действии раствора дихромата калия в концентрированной серной кислоте феназон и метамизол-натрий приобретают зеленое окрашивание, а фенилбутазон — темно-красное. Идентифицировать производные пиразола можно с помощью цветных реакций, которые они дают с различными реактивами: концентрированной азотной кислотой, смесью концентрированных азотной и серной кислот, с 0,5%-ным раствором ванадата аммония в концентрированной серной кислоте, 1%-ным раствором n-диметиламинобензальдегида в разведенной хлороводородной кислоте (после погружения в кипящую водяную баню).

Подлинность феназона подтверждают реакцией образования окрашенной в красный цвет комплексной соли — феррифеназона 3C₁₁H₁₂ON₂×2FeCl₃ и по реакции с иодом, вследствие которой получается осадок 4-иодофеназона.

Для отличия феназона от других производных пиразола ФС рекомендует реакцию образования окрашенного в изумрудно-зеленый цвет нитрозофеназона:

Метамизол-натрий в этих условиях приобретает постепенно исчезающее темно-синее окрашивание.

Можно использовать специфичную для феназона цветную реакцию, основанную на образовании окрашенного соединения с раствором 2-нитроиндандиона, а также реакцию образования пиразолонового азокрасителя феназона с a-нафтиламином:

Метамизол-натрий, в отличие от других производных пиразолона-5 дает положительную реакцию на ион натрия, а при нагревании на водяной бане с минеральными кислотами выделяет диоксид серы и формальдегид, которые обнаруживают по запаху:

После охлаждения прибавляют раствор хлорида железа (III); через 2 мин появляется темно-красное окрашивание.

Если реакцию на метамизол-натрий с минеральными кислотами выполнять в присутствии концентрированной серной и салициловой кислот, то образуется (за счет выделяющегося формальдегида) ауриновый краситель, имеющий интенсивное красное окрашивание. При окислении метамизола-натрия раствором иодата калия в присутствии хлороводородной кислоты раствор приобретает малиновое окрашивание. От избытка реактива окраска усиливается, а затем выделяется бурый осадок иода. Происходит это за счет взаимодействия иодата калия с образующимся при гидролизе метамизола-натрия диоксидом серы:

5SO₂ + 2KIO₃ ¾® 4SO₃ + I₂ + K₂SO₄

Раствор феназона в этих условиях остается бесцветным.

Серу в метамизоле-натрия обнаруживают также путем прокаливания в смеси карбонатов натрия и калия в течение 10 мин. Плав охлаждают, растворяют в азотной кислоте и фильтруют. Образовавшиеся сульфат-ионы обнаруживают с помощью раствора хлорида бария.

Фенилбутазон можно идентифицировать реакциями осаждения солями: меди (осадок бледно-голубого цвета); серебра (белого цвета) и т.д. Для выполнения реакции вначале получают натриевую соль фенилбутазона, действуя раствором гидроксида натрия (происходит образование енольной формы):

Затем к натриевой соли добавляют раствор сульфата меди:

Феназон и метамизол-натрий под действием раствора сульфата меди (II) приобретают зелёное окрашивание. Производные пиразола ввиду наличия основных свойств дают характерные реакции с оcадительными (общеалкалоидными) реактивами. При нагревании метамизола-натрия с реактивом Миллона (раствор ртути в азотной кислоте) возникает темно-синее окрашивание.

При испытаниях на чистоту особое внимание следует уделять обнаружению специфических примесей. В феназоне обнаруживают органические примеси, а также бензолсульфонат натрия (по прозрачности 10%-ного раствора в дихлорэтане). Посторонние примеси (не более 0,5%) в метамизоле-натрия устанавливают методом ТСХ на пластинках Силуфол УФ-254, сравнивая с СОВС 4-аминофеназона. Хроматографируют восходящим методом в камере с системой хлороформ-метанол (9:1), сушат и просматривают в УФ-свете при 254 нм, сравнивая пятна и значения R_f. В фенилбутазоне устанавливают отсутствие примеси гидразобензола по отрицательной цветной реакции с хлоридом железа (III) в среде концентрированной серной кислоты.

Количественное определение

Для количественного анализа используют реакции замещения, а также восстановительные, основные или кислотные свойства растворов производных пиразолона.

Иодометрическое определение феназона (обратное титрование) основано на его способности вступать с иодом в реакцию замещения за счет подвижного атома водорода в положении 4. Образующийся осадок 4-иодофеназона может адсорбировать некоторое количество иода. Поэтому осадок растворяют в хлороформе. Добавляют также ацетат натрия, чтобы предотвратить обратную реакцию. Избыток иода оттитровывают раствором тиосульфата натрия:

HI + CH₃COONa ¾® NaI + CH₃COOH

Образование 4-иодофеназона лежит в основе иодхлорометрического определения феназона. Оно может быть выполнено прямым титрованием 0,1 М раствором иодмонохлорида (индикатор крахмал) в присутствии 1 капли 1%-ного раствора иодида калия или по избытку иодмонохлорида (обратное титрование) в присутствии 10 мл 10%-ного раствора иодида калия. Выделившийся при этом иод титруют 0,1 М раствором тиосульфата натрия (индикатор крахмал).

Иодхлорометрическое определение, основанное на реакции замещения, можно использовать для определения фенилбутазона, который растворяют при нагревании в 0,1 М растворе гидроксида натрия, нейтрализуют 0,1 М раствором хлороводородной кислоты и в среде натрия гидрокарбоната титруют 0,1 М раствором иодмонохлорида (индикатор крахмал):

ICl + KI ¾® I₂ + KCl

Иодометрическое определение метамизола-натрия выполняют методом прямого титрования иодом в слабокислой водно-спиртовой среде [до окисления серы (IV) в серу (VI)]:

Конечную точку титрования можно установить по избытку титрованного раствора иода (желтое окрашивание).

Описан способ цериметрического определения фенилбутазона в водно-спиртовой среде в присутствии серной кислоты. В кислой среде при нагревании происходит гидролиз фенилбутазона с образованием гидразобензола, который окисляется сульфатом церия до азобензола. Общая схема этого процесса:

Избыток титранта устанавливают иодометрическим методом. Метамизол-натрий можно определить по сульфат-иону, который образуется в результате окисления 3%-ным раствором пероксида водорода. Затем титруют раствором хлорида бария. Известны также методики косвенного комплексонометрического и ацидиметрического определения метамизола-натрия.

Количественное определение пропифеназона выполняют методом неводного титрования, используя в качестве растворителя диоксан. Титрантом служит 0,1 М раствор хлорной кислоты в ледяной уксусной кислоте (индикатор кристаллический фиолетовый).

Количественное определение фенилбутазона по ФС основано на нейтрализации раствора навески в ацетоне 0,1 М раствором гидроксида натрия с применением индикатора фенолфталеина. В этом способе использованы кислотные свойства енольной формы фенилбутазона:

Количественное определение пропифеназона в лекарственных формах выполняют методом ВЭЖХ, одновременно подтверждая его подлинность. На хроматограмме испытуемого раствора образуется пик с временем удерживания и УФ-абсорбционными характеристиками, аналогичными хроматограмме раствора сравнения пропифеназона. Для количественного определения используют обращенно-фазовый вариант ВЭЖХ. Неподвижная фаза — октадецилсилил на силикагеле (5 мкм), подвижная фаза — метанол-вода-0,01 М фосфорная кислота.

Предложены также способы количественного определения методом ИК-спектрофотометрии в области «отпечатков пальцев»: феназона (1140 см^–1), фенилбутазона (1590 см^–1). В качестве растворителей использовали хлороформ или тетрахлорметан. Относительная погрешность определения ±0,5-1,0%.

Известны, основанные на цветных реакциях, фотоколориметрические методики анализа производных пиразола. Особенно перспективным оказалось применение дифференциальной спектрофотометрии в ультрафиолетовой области, позволяющей с высокой точностью определять производные пиразола в лекарственных формах (В.Г. Беликов, С.Х. Муцуева).

Хранение и применение

Производные пиразола хранят в хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света, по списку Б. Особенно чувствителен к действию света и влаги метамизол-натрий, поэтому его следует хранить в хорошо укупоренных банках оранжевого стекла. Пожелтение метамизола-натрия при хранении (особенно в водных растворах) связано с воздействием температуры, кислорода, света, воздуха, процессом гидролиза и др. Исследования, проведенные методами ГЖХ, ТСХ, УФ-, ИК-, ЯМР-спектроскопии, показали, что при этом могут образовываться примеси 4-оксиаминофеназона, N’,N’-метиленбисаминофеназона, 4-метиламинофеназона.

Производные пиразола применяют в качестве болеутоляющих, жаропонижающих и противовоспалительных средств. Феназон, метамизол-натрий и пропифеназон назначают внутрь при головных болях, невралгиях, артритах и других заболеваниях по 0,25–0,5 г на прием. Метамизол-натрий ввиду хорошей растворимости в воде можно вводить подкожно, внутримышечно и внутривенно в виде 50%-ного раствора. Фенилбутазон назначают главным образом при острых формах ревматизма и полиартритов по 0,1–0,15 г. Пропифеназон проявляет анальгезирующее действие в несколько раз более сильное, чем феназон. Он входит в состав анальгетических лекарственных форм (саридон) по 0,15 г.

ГЛАВА 58.