Лабораторно-практическое занятие

«Качественные реакции на гормоны»

Цель работы: Изучить качественные реакции на гормоны, исследовать химическую природу гормонов с помощью проведенных реакций.

Оборудование: штатив с пробирками, стеклянные палочки, спички, ступка с пестиком, спиртовка, держатели для пробирок, электроплитка, асбестовая сетка.

Реактивы:раствор адреналина – 1г/л (1:1000), раствор инсулина, таблетки тиеодина, 3%-ный раствор хлорида железа (III), 10%-ный и 30%-ный растворы NaOH, диазореактив (смесь 1/1 1%-ной сульфаниловой кислоты и 5%-ного NaNO₂), 1%-ный раствор KI, 10%-ный раствор уксусной кислоты, 1%-ный раствор CuSO₄, 5%-ный раствор ацетата свинца, 10%-ный раствор KOH, дистил.вода, 10%-ный раствор серной кислоты, лакмус, 1%-ный раствор крахмала, 1%-ный раствор йодата калия, хлороформ, конц. азотная кислота.

Методические рекомендации к занятию

При подготовке к занятию необходимы знания об особенностях строения, классификации, биологической роли основных гормонов. При выполнении лабораторного практикума нужны знания качественных реакций на гормоны, влияние различных факторов на их свойства.

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ

Часть 1. Качественные реакции на инсулин

1. Биуретовая реакция.

2. Ксантопротеиновая реакция.

3.Реакция на слабосвязанную серу (Фоля).

Часть 2. Качественные реакции на адреналин

1. Реакция с хлорным железом (FeCl₃).

7. Реакция с йодатом калия.

2. Диазореакция

Часть 3.Качественные реакции на гормоны щитовидной железы

Часть 1. Качественные реакции на инсулин

1. Биуретовая реакция

К 5 каплям инсулина добавить 5 капель 10% раствора гидроксида натра и 1 каплю (избыток мешает получению результатов реакции!!!) 1% раствора сульфата меди (II). Жидкость окрашивается в фиолетовый цвет.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Ксантопротеиновая реакция

К 5 каплям инсулина добавить 3 капли концентрированной азотной кислоты, образуется осадок белка, который при осторожном нагревании на водяной бане окрашивается в желтый цвет. К охлажденной пробе (!!!) добавляют избыток аммиака - появляется оранжевое окрашивание вследствие образования хиноидного производного тирозина.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Реакция на слабосвязанную серу (Фоля)

Вначале денатурируют белок, добавляя к 5 каплям раствора инсулина 1% раствор уксуснокислого свинца к каплям до выпадения осадка. Затем также по каплям добавляют 10% раствор NaOH до полного просветления жидкости (растворение осадка денатурированного белка). Пробирку нагревают в кипящей водяной бане, пока раствор не окрасится в темный (черный) цвет за счет образования осадка сульфида свинца.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Часть 2. Качественные реакции на адреналин

Реакция с хлорным железом

Адреналин, в молекулу которого входит фенольное кольцо, образует с хлорным железом соединение типа фенолята.

В пробирку внести 2 - 3 капли раствора адреналина (1:1000) и каплю 1% раствора хлорного железа. Жидкость окрашивается в изумрудно-зеленый цвет, переходящий при стоянии в желтый.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

2.Реакция с йодатом калия (КJО₃)

Продукты «хиноидного» окисления адреналина окрашивают раствор адреналина в цвета от розового до бурого. В условиях опыта адреналин окисляется в пигмент - галохром, имеющий красно-фиолетовую окраску.

В пробирку внести 2-3 капли раствора адреналина (1:1000), 2 капли 1% раствора йодата калия и 2 капли 10% раствора уксусной кислоты. При легком нагревании появляется красно-фиолетовое окрашивание.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Диазореакция

При взаимодействии адреналина с диазореактивом образуется азокраситель красного цвета.

В пробирку внести 3 капли 1% раствора сульфаниловой кислоты, 3 капли 5% раствора азотистого натрия, 5 капель адреналина (1:100) и 3 капли 10% раствора углекислого натрия. Жидкость окрашивается в красный цвет.

РЕЗУЛЬТАТЫ: