Часть 2. Качественные реакции на водорастворимые витамины

1. Качественные реакции на витамин В₁

Витамин В₁ (тиамин, анейрин)

Диазореакция на витамин В₁.

В основе этого метода обнаружения лежит способность тиамина образовывать в щелочной среде с диазореактвом (диазосульфаниловой кислотой) комплекс оранжево-красного цвета.

Ход определения

Диазореактив готовят, сливая в пробирку по 5 капель 1%-ного раствора сульфаниловой кислоты и 5%-ного раствора нитрита натрия. В эту же пробирку добавляют на кончике скальпеля порошок тиамина и затем по стенке наклоненной пробирки осторожно приливают 5-7 капель 10%-ного раствора карбоната натрия. На границе двух жидкостей появляется кольцо оранжево-красного цвета.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Взаимодействие витамина В₁ с гексацианоферратом (III) калия

К раствору тиамина приливают 1 мл 5% раствора гексацианоферрата (III) калия, 1 мл 30% раствора щелочи и полученный раствор перемешивают. Далее к полученной смеси приливают 3 мл изобутилового спирта, полученный раствор хорошо взбалтывают. Верхний спиртовой слой при помощи капилляра или микропипетки переносят в сухую пробирку и наблюдают голубую флюоресценцию раствора в ультрафиолетовых лучах. Смесь в пробирке при перемешивании нагревают на водяной бане. Наблюдают появление желтой окраски.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

2.Качественные реакции на витамин В₂

Окисленная форма витамина В₂ представляет собой желтое флюоресцирующее в ультрафиолетовых лучах вещество. Реакция на витамин В₂ основана на его способности легко восстанавливаться. При этом раствор приобретает сначала розовый цвет промежуточных соединений, а затем обесцвечивается, т.к. восстановленная форма витамина В₂ бесцветна.

Ход определения

В пробирку наливают 10 капель раствора витамина В₂, добавляют 5 капель конц. соляной кислоты и опускают гранулу металлического цинка. Начинается выделение пузырьков водорода, жидкость постепенно розовеет, затем обесцвечивается.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

3.Качественные реакции на витамин В₆

Витамин В₆ (пиридоксин, адермин)

Феррихлоридная проба на витамин В₆

Бесцветный раствор витамина В₆ приобретает красную окраску в присутствии хлорного железа. Реакция обусловлена образованием комплексной соли красного цвета типа фенолята железа.

Ход определения

В пробирке смешивают 5 капель 5%-го водного раствора витамина В₆ и 1 каплю 5%-го раствора хлорного железа и встряхивают ее. Смесь окрашивается в красный цвет.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Качественные реакции на витамин Р

Витамин Р (рутин, цитрин)

Ход определения

На аналитических весах берут навеску 100 мг чая, добавляют 15 мл дистиллированной воды и кипятят в течение 3 минут. Дают остыть, отбирают в пробирку 1 мл жидкости и добавляют несколько кристалликов хлорида железа (III). Перемешивают и разбавляют в 2-3 раза дистиллированной водой. Наблюдают за появлением окрашивания.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Качественные реакции на витамин РР

Витамин РР (противопеллагрический витамин)